ABHD6 Plasmide Double Nickase (h): sc-405114-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABHD6 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABHD6 Double Nickase Plasmid (h) e il ABHD6 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABHD6. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABHD6 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405114-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABHD6 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405114-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD6 (abhydrolase domain containing 6) è un’idrolasi della serina che regola la segnalazione lipidica idrolizzando l’endocannabinoide 2-arachidonoilglicerolo e monoacilgliceroli correlati, modellando così i pool cellulari di derivati dell’acido arachidonico e le risposte eicosanoidi a valle. Attraverso il controllo del metabolismo dei glicerolipidi e degli endocannabinoidi, ABHD6 influenza il rimodellamento dei lipidi di membrana, l’omeostasi metabolica e le vie di trasduzione del segnale legate all’infiammazione e ai processi neuromodulatori. Alterazioni dell’attività di ABHD6 sono state studiate in contesti di disregolazione metabolica, neuroinfiammazione e rimodellamento lipidico associato ai tumori, in cui la segnalazione lipidica può influenzare proliferazione, migrazione e interazioni immunitarie. Queste caratteristiche rendono ABHD6 un bersaglio utile per analizzare fenotipi guidati dai lipidi usando modelli di perturbazione genetica in cellule umane.
ABHD6 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABHD6 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABHD6. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABHD6. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABHD6 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.