ABCA2 Plasmide Double Nickase (h): sc-405934-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABCA2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABCA2 Double Nickase Plasmid (h) e il ABCA2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABCA2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABCA2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABCA2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABCA2 codifica un trasportatore della famiglia ATP-binding cassette (ABC) localizzato prevalentemente sulle membrane endolisosomiali, dove contribuisce alla gestione intracellulare dei lipidi e all’omeostasi di membrana. Accoppiando l’idrolisi dell’ATP al trasporto del substrato, ABCA2 influenza il traffico di colesterolo e sfingolipidi, la dinamica vescicolare e vie più ampie di proteostasi che intersecano le funzioni endocitiche e lisosomiali. Alterazioni nell’espressione di ABCA2 sono state associate a processi rilevanti per la neurobiologia e alla disregolazione lipidica, e il gene è spesso studiato in contesti in cui la composizione di membrana incide sulla segnalazione e sulle risposte cellulari allo stress. In quanto grande trasportatore multi-pass, ABCA2 funge anche da modello per indagare la regolazione dei trasportatori ABC, la localizzazione subcellulare e le conseguenze delle perturbazioni del trasporto lipidico.
ABCA2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABCA2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABCA2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABCA2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABCA2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.