53BP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403004-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- 53BP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il 53BP2 Double Nickase Plasmid (h) e il 53BP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TP53BP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: 53BP2 Antibody (H-4): sc-398311
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
53BP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403004-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
53BP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403004-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP53BP2 codifica 53BP2 (nota anche come ASPP2), una proteina adattatrice ricca in prolina che si lega al dominio di legame al DNA di p53 e modula programmi trascrizionali che regolano apoptosi, controllo del ciclo cellulare e risposte allo stress. Attraverso interazioni con membri della famiglia di p53 e con componenti di complessi citoscheletrici e giunzionali, 53BP2 collega la sorveglianza del genoma alla polarità cellulare e alla segnalazione di sopravvivenza. Partecipa a vie connesse alle risposte al danno al DNA, alla segnalazione apoptotica e alla regolazione degli output trascrizionali che influenzano l’idoneità cellulare. La disregolazione dell’espressione o della funzione di TP53BP2 è stata associata ad alterazioni dell’attività della via di p53 ed è studiata nel contesto della biologia tumorale, dell’instabilità genomica e di difetti nella morte cellulare programmata.
53BP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TP53BP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TP53BP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TP53BP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TP53BP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.