RIPA Lysis Buffer System

Il sistema di tampone di lisi RIPA (Radio-Immunoprecipitation Assay) è ampiamente utilizzato nel campo della biochimica e della biologia molecolare per la lisi e la solubilizzazione di cellule e tessuti. Il tampone è progettato per disgregare efficacemente le membrane cellulari e solubilizzare le proteine cellulari, rendendolo una scelta ideale per l'estrazione delle proteine per le analisi successive, come il Western blotting e l'immunoprecipitazione. Il tampone RIPA contiene una miscela di tre detergenti: sodio desossicolato, NP-40 e SDS. Questa combinazione è particolarmente efficace nel solubilizzare un'ampia gamma di classi proteiche, rendendola adatta per studi completi sulla composizione delle proteine cellulari. Il sodio desossicolato e l'NP-40 sono detergenti non ionici e ionici rispettivamente, che interrompono maggiormente le interazioni lipidi-lipidi e lipidi-proteine, mentre l'SDS fornisce un forte ambiente anionico che denatura le proteine, assicurandone la solubilità. L'efficacia del tampone RIPA è ulteriormente migliorata dalla presenza di agenti tampone e additivi come il Tris, che mantiene un pH costante, e il cloruro di sodio, che fornisce una forza ionica che può contribuire alla stabilizzazione delle proteine. È possibile aggiungere componenti opzionali come l'EDTA per chelare i cationi divalenti e prevenire la degradazione delle proteine target da parte delle proteasi. Nella ricerca scientifica, il tampone RIPA è apprezzato per la sua robustezza e versatilità nell'estrazione delle proteine in condizioni che mantengono la maggior parte delle modifiche post-traduzionali e delle interazioni proteina-proteina. Ciò lo rende uno strumento fondamentale nella proteomica e in altri studi di biologia cellulare in cui è essenziale una comprensione dettagliata delle interazioni e delle funzioni delle proteine.

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