ZNF526 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-431684

Panoramica

Zfp526 codifica la proteina a dita di zinco murina ZNF526, un presunto fattore nucleare legante il DNA implicato nella regolazione trascrizionale attraverso interazioni, mediate da dita di zinco di tipo C2H2, con elementi regolatori. Come molti fattori a dita di zinco associati a KRAB, ci si aspetta che ZNF526 partecipi al silenziamento genico dipendente dalla cromatina e alla modulazione di programmi trascrizionali specifici di linea che influenzano lo stato cellulare e la differenziazione. Un’alterata espressione o deregolazione dei fattori di trascrizione a dita di zinco può perturbare le reti di controllo epigenetico e le vie di segnalazione a valle, offrendo un quadro per studiare i meccanismi di regolazione genica rilevanti per fenotipi dello sviluppo e squilibri trascrizionali associati a patologie. L’analisi funzionale di Zfp526 supporta indagini su come le interfacce tra fattori di trascrizione e cromatina plasmino l’espressione genica e l’omeostasi cellulare in sistemi modello murini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZNF526 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Zfp526 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Zfp526 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Zfp526 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZNF526.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Zfp526 per lo studio della segnalazione di ZNF526, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Zfp526 critici per la funzione di ZNF526
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Zfp526 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZNF526 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ZNF526 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Zfp526. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZNF526 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ZNF526 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Zfp526 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Zfp526 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.