ZNF43 Plasmide Double Nickase (h): sc-416697-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZNF43 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZNF43 Double Nickase Plasmid (h) e il ZNF43 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZNF43. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZNF43 Plasmide Double Nickase (h) | sc-416697-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZNF43 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-416697-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF43 codifica una proteina a dita di zinco che si prevede funzioni nel legame al DNA in modo sequenza-specifico e nella regolazione di programmi di espressione genica che determinano lo stato cellulare e la trascrizione specifica di linea. In quanto presunto fattore nucleare, ZNF43 è rilevante per vie che governano l’organizzazione della cromatina, le dinamiche di repressione/attivazione trascrizionale e il mantenimento della stabilità genomica attraverso un controllo coordinato dei geni bersaglio a valle. Reti alterate di proteine a dita di zinco sono spesso associate a differenziazione disregolata e a segnalazione di risposta allo stress, fornendo una motivazione per studiare ZNF43 in modelli di proliferazione e trasformazione cellulare. La perturbazione funzionale di ZNF43 supporta studi meccanicistici della circuiteria trascrizionale e delle relazioni genotipo–fenotipo nelle cellule umane.
ZNF43 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZNF43 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZNF43. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZNF43. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZNF43 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.