ZMYM1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407092

Panoramica

ZMYM1 (proteina 1 a dita di zinco di tipo MYM) è un regolatore trascrizionale nucleare implicato nel controllo dell’espressione genica dipendente dalla cromatina. Grazie alla sua architettura a dita di zinco e alle interazioni con complessi corepressori, ZMYM1 contribuisce alla repressione trascrizionale, al mantenimento degli stati epigenetici e al coordinamento di programmi legati alla progressione del ciclo cellulare e alle risposte al danno del DNA. Un’attività deregolata di ZMYM1 è stata associata a reti trascrizionali alterate osservate nel cancro e in altri disturbi in cui la regolazione della cromatina è compromessa, rendendola rilevante per studi meccanicistici del controllo genico nelle cellule umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZMYM1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZMYM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZMYM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZMYM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZMYM1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZMYM1 per lo studio della segnalazione di ZMYM1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ZMYM1 critici per la funzione di ZMYM1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZMYM1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZMYM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZMYM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZMYM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZMYM1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZMYM1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZMYM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZMYM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.