Wnt-7b Plasmide Double Nickase (m): sc-423722-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Wnt-7b Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Wnt-7b Double Nickase Plasmid (m) e il Wnt-7b Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Wnt7b. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Wnt-7b Plasmide Double Nickase (m) | sc-423722-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Wnt-7b Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423722-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Wnt7b codifica Wnt-7b, un ligando glicoproteico secreto che attiva la segnalazione Wnt per regolare il patterning embrionale, la morfogenesi tissutale e decisioni di destino cellulare specifiche d’organo. Wnt-7b può interagire con i recettori Frizzled/LRP per stimolare la trascrizione canonica dipendente dalla β-catenina, oltre a programmi di segnalazione non canonici che modellano proliferazione, polarità e migrazione. In contesti di sviluppo e di omeostasi tissutale, l’attività di Wnt-7b è stata collegata a interazioni epitelio–mesenchimali e al rimodellamento vascolare, risultando rilevante per lo studio degli output deregolati della via Wnt osservati in diversi modelli di malattia. Alterazioni dell’espressione di Wnt7b o del “tono” di segnalazione sono spesso investigate per il loro impatto sugli stati di differenziamento, sulla dinamica della matrice extracellulare e sul cross-talk di via con la segnalazione di fattori di crescita e infiammatoria.
Wnt-7b Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Wnt7b nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Wnt7b. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Wnt7b. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Wnt7b interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.