Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Wnt-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423717
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wnt-4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Wnt-4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Wnt-4 Anticorpo (B-6): sc-376279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wnt-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423717 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Wnt4 codifica o ligante sinalizador secretado Wnt-4, um regulador-chave da atividade da via WNT que molda o desenvolvimento embrionário e a homeostase dos tecidos no adulto. Em camundongos, Wnt-4 influencia decisões de destino celular, polaridade, migração e diferenciação por meio da ativação dependente do contexto da sinalização canônica mediada por β-catenina e de vias WNT não canônicas. Está fortemente associado à morfogênese do trato reprodutivo e dos rins, a programas osteogênicos e estromais e à modulação do microambiente imune por meio de redes a jusante de remodelação transcricional e do citoesqueleto. A sinalização de Wnt-4 desregulada tem sido associada a fenótipos do desenvolvimento e a processos relevantes para doenças, como fibrose, diferenciação aberrante e reprogramação de vias associada a tumores, usados como leituras mecanísticas em modelos de pesquisa biomédica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Wnt4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Wnt4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Wnt4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Wnt4 para a investigação da sinalização de Wnt-4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Wnt4 críticos para a função Wnt-4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Wnt4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Wnt-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Wnt-4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Wnt4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Wnt-4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Wnt4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Wnt4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.