UGT8 Plasmide Double Nickase (m): sc-423604-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UGT8 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il UGT8 Double Nickase Plasmid (m) e il UGT8 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ugt8a. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UGT8 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423604-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ugt8a codifica per la UDP-galattosio:ceramide galattosiltransferasi (UGT8), una glicosiltransferasi residente nel Golgi che catalizza la formazione del galattosilceramide, uno sfingolipide chiave arricchito nelle cellule gliali mielinizzanti. Controllando i livelli di galattosilceramide e di glicolipidi correlati, UGT8 influenza la composizione dei microdomini di membrana, il traffico vescicolare e la biogenesi della mielina, intersecandosi con vie più ampie del metabolismo degli sfingolipidi e dell’omeostasi lipidica. Nel topo, un’alterata attività di UGT8 è rilevante per gli studi sullo sviluppo del sistema nervoso e sull’integrità della sostanza bianca e offre un punto d’ingresso molecolare per indagare come lo squilibrio dei glicolipidi contribuisca a fenotipi neuroinfiammatori e neurodegenerativi in modelli sperimentali.
UGT8 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ugt8a nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ugt8a. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ugt8a. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ugt8a interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.