TSPYL1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423529

Panoramica

Tspyl1 codifica TSPYL1, un membro della famiglia delle proteine di assemblaggio dei nucleosomi (NAP) implicato nell’organizzazione della cromatina e nella regolazione della trascrizione. Nelle cellule di topo, TSPYL1 è stato collegato al controllo della progressione del ciclo cellulare e della differenziazione attraverso la modulazione epigenetica dei programmi di espressione genica, influenzando processi quali la trascrizione dipendente dal DNA e l’accessibilità della cromatina. Modellando gli stati della cromatina, TSPYL1 può influire su vie che regolano la proliferazione e le risposte allo stress cellulare, rendendolo rilevante per studi su fenotipi dello sviluppo e sui meccanismi di trasformazione oncogena. La disregolazione delle proteine della famiglia TSPYL è stata associata ad alterazioni del controllo della crescita e a firme trascrizionali rilevanti per la malattia, a supporto del suo impiego come bersaglio nella genomica funzionale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TSPYL1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tspyl1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tspyl1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tspyl1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TSPYL1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tspyl1 per lo studio della segnalazione di TSPYL1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Tspyl1 critici per la funzione di TSPYL1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tspyl1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TSPYL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TSPYL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tspyl1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TSPYL1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TSPYL1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tspyl1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tspyl1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.