Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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translin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423528
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- translin Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico translin, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: translin Antibody (C-2): sc-390472
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
translin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423528 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Tsn** codifica translin, una proteina conservata in grado di legare RNA e DNA, che forma un complesso eteromerico con trax (TSNAX) e partecipa alla regolazione genica post-trascrizionale. Translin è stato associato al trasporto e alla stabilità dell’RNA, al processamento dei microRNA tramite il complesso nucleasico C3PO e alla modulazione della traduzione localizzata in contesti neuronali e delle cellule germinali. Attraverso queste attività, TSN influenza la segnalazione in risposta allo stress e i programmi di espressione genica che modellano proliferazione e differenziamento cellulari. Alterazioni delle reti regolatorie dell’RNA associate a TSN sono state implicate in fenotipi neurocomportamentali e nella regolazione metabolica, rendendo **Tsn** un locus utile per analizzare meccanismi mediati dall’RNA in modelli rilevanti per la malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO translin (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tsn in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tsn insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tsn a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina translin.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tsn per lo studio della segnalazione di translin, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Tsn critici per la funzione di translin
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tsn per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal translin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal translin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tsn. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal translin Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR translin (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tsn per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tsn definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.