TRAF7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404992

Panoramica

TRAF7 codifica una ligasi E3 dell’ubiquitina e una proteina adattatrice della famiglia dei TNF receptor–associated factor, che integra la segnalazione prossimale al recettore con il controllo della stabilità proteica dipendente dall’ubiquitina. TRAF7 regola molteplici vie di risposta allo stress e all’infiammazione, incluse le vie di segnalazione MAPK e NF-κB, e influenza l’apoptosi, l’organizzazione del citoscheletro e la polarità cellulare attraverso l’ubiquitinazione di componenti chiave della segnalazione. Un’attività di TRAF7 deregolata e mutazioni ricorrenti di TRAF7 sono state riportate in diversi contesti tumorali, a supporto di un ruolo nella segnalazione oncogenica, nel controllo trascrizionale e nelle risposte al microambiente. In quanto nodo di via, TRAF7 è spesso studiato nell’ambito della proteostasi, della trasduzione del segnale e del controllo della crescita dipendente dal contesto.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TRAF7 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TRAF7 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TRAF7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TRAF7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TRAF7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TRAF7 per lo studio della segnalazione di TRAF7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TRAF7 critici per la funzione di TRAF7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TRAF7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TRAF7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TRAF7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TRAF7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TRAF7 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TRAF7 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TRAF7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TRAF7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.