Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423489
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TR2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TR2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TR2 Anticorpo (D-4): sc-374049
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423489 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Nr2c1 de camundongo codifica o receptor nuclear órfão TR2, um fator de transcrição específico de sequência que se liga a elementos de resposta hormonal e modula programas de expressão gênica associados a decisões de destino celular. O TR2 participa de vias de sinalização de receptores nucleares e de redes de correpressores/coativadores transcricionais que influenciam diferenciação, proliferação e homeostase metabólica, com papéis de destaque descritos no desenvolvimento de células germinativas e em circuitos regulatórios associados à pluripotência. Por meio dessas funções transcricionais, o NR2C1 pode afetar o estado da cromatina e vias de comprometimento de linhagem que frequentemente estão alteradas em anomalias do desenvolvimento e na desregulação transcricional relacionada ao câncer. Assim, o Nr2c1 é um alvo útil para dissecar mecanismos de regulação gênica subjacentes a estados semelhantes aos de células-tronco e à diferenciação específica de tecidos em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TR2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nr2c1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nr2c1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nr2c1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TR2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nr2c1 para a investigação da sinalização de TR2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nr2c1 críticos para a função TR2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nr2c1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TR2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nr2c1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TR2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TR2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nr2c1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nr2c1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.