TP53INP2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-427155

Panoramica

Trp53inp2 codifica TP53INP2, una proteina nucleare e citoplasmatica inducibile dallo stress, implicata nella regolazione dell’autofagia e di programmi trascrizionali legati all’omeostasi cellulare. È stato riportato che TP53INP2 partecipi alla formazione e al traffico degli autofagosomi attraverso interazioni con i componenti della macchina autofagica, sostenendo vie di rilevamento dei nutrienti e di controllo di qualità degli organelli. Nei modelli murini e nei sistemi cellulari, l’attività di TP53INP2 viene comunemente analizzata nel contesto dell’adattamento metabolico, delle decisioni di sopravvivenza cellulare e delle risposte allo stress ossidativo o genotossico. La disregolazione dell’autofagia e della segnalazione da stress associate a TP53INP2 è rilevante per studi di biologia tumorale, stati infiammatori e processi neurodegenerativi, in cui l’alterazione della proteostasi è una caratteristica fondamentale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TP53INP2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Trp53inp2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Trp53inp2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Trp53inp2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TP53INP2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Trp53inp2 per lo studio della segnalazione di TP53INP2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Trp53inp2 critici per la funzione di TP53INP2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Trp53inp2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal TP53INP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Trp53inp2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TP53INP2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR TP53INP2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Trp53inp2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Trp53inp2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.