TICAM-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-414627

Panoramica

TICAM1 codifica TICAM-1 (nota anche come TRIF), un adattatore citosolico che collega il recettore Toll-like 3 e il ramo della segnalazione di TLR4 dipendente da TRAM ai programmi trascrizionali dell’immunità innata. In seguito all’attivazione del recettore, TICAM-1 coordina l’assemblaggio di complessi di segnalazione che coinvolgono TBK1/IKKε e IRF3 per indurre risposte a interferone di tipo I, e contribuisce inoltre all’attivazione delle vie NF-κB e MAPK, modulando l’espressione di citochine infiammatorie. Questo nodo è centrale nel riconoscimento antivirale dell’RNA a doppio filamento (dsRNA) e nella regolazione dell’omeostasi dell’immunità innata nei compartimenti mieloidi ed epiteliali. Una segnalazione deregolata di TICAM-1 è stata implicata in risposte dell’ospite alterate alle infezioni virali e in fenotipi infiammatori rilevanti per i meccanismi di malattie immunomediate.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TICAM-1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TICAM1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TICAM1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TICAM1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TICAM-1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TICAM1 per lo studio della segnalazione di TICAM-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TICAM1 critici per la funzione di TICAM-1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TICAM1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TICAM-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TICAM-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TICAM1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TICAM-1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TICAM-1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TICAM1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TICAM1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.