TGF beta Receptor 2/TGFBR2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400144-LAC

O TGFBR2 codifica o receptor 2 do fator de crescimento transformador beta (TGF-βR2), uma quinase transmembranar de serina/treonina que inicia a sinalização canónica do TGF-β ao fosforilar o TGFBR1 e ativar o SMAD2/3 para regular programas de transcrição que controlam a proliferação, a diferenciação, a remodelação da matriz extracelular e a modulação imunitária. Por meio de interações (cross-talk) com as vias MAPK, PI3K/AKT e de GTPases do tipo Rho, o TGF-βR2 ajuda a coordenar a transição epitélio–mesênquima, a paragem do ciclo celular e a homeostase tecidular. A expressão ou a sinalização alteradas de TGFBR2 perturbam a resposta a citocinas e as interações estroma–epitélio, sendo frequentemente implicadas em estados inflamatórios desregulados e na biologia tumoral, incluindo alterações no controlo do crescimento e em fenótipos associados à invasão. Como nó central na sinalização de recetores dependente de ligando, o TGFBR2 é estudado rotineiramente na arquitetura das vias, nas respostas transcricionais e na remodelação específica do contexto do microambiente celular.

As Partículas de Ativação Lentivirais TGF beta Receptor 2/TGFBR2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TGFBR2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TGF beta Receptor 2/TGFBR2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TGFBR2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TGF beta Receptor 2/TGFBR2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TGFBR2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.