Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Tctex2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423317
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Tctex2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Tctex2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Tctex2 Antibody (H-5): sc-74541
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Tctex2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423317 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Tcte3 codifica Tctex2, una proteina associata alle catene leggere della dineina, implicata nei processi di trasporto basati sui microtubuli che sostengono la polarizzazione e la motilità cellulare. Nel topo, Tctex2 è soprattutto collegata alla funzione di ciglia e flagelli, dove il movimento guidato dalla dineina e il traffico di carichi sono essenziali per la dinamica dell’assonema e la motilità degli spermatozoi. L’alterazione di componenti accessori della dineina può perturbare la ciliogenesi, il trasporto intraflagellare e l’organizzazione correlata al centrosoma, con effetti misurabili sulla segnalazione cellulare e sulla definizione dei pattern di sviluppo. Di conseguenza, Tcte3/Tctex2 è rilevante per la ricerca su fenotipi associati alle ciglia, modelli di infertilità maschile e meccanismi che collegano il trasporto citoscheletrico all’omeostasi tissutale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Tctex2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Tcte3 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Tcte3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Tcte3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Tctex2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Tcte3 per lo studio della segnalazione di Tctex2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Tcte3 critici per la funzione di Tctex2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Tcte3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Tctex2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Tctex2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Tcte3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Tctex2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Tctex2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Tcte3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Tcte3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.