TCP-1 ζ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403047-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TCP-1 ζO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TCP-1 ζ (h) e o Plasmídeo Double Nickase TCP-1 ζ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCT6A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TCP-1 ζ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TCP-1 ζ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCT6A codifica a subunidade humana TCP-1 ζ (zeta) do complexo de chaperonina TRiC/CCT, uma máquina de dobramento dependente de ATP que auxilia a maturação de uma ampla gama de proteínas citosólicas. O TRiC/CCT sustenta a proteostase ao promover o dobramento correto de actina, tubulina e outros clientes complexos com múltiplos domínios, impactando assim a organização do citoesqueleto, a progressão do ciclo celular e a adaptação ao estresse. Ao influenciar a estabilidade e a montagem funcional de proteínas-chave de sinalização e estruturais, a TCP-1 ζ conecta o dobramento mediado por chaperonas a vias que governam a proliferação e a homeostase celular. A desregulação de componentes do TRiC/CCT, incluindo CCT6A, tem sido investigada em contextos de desequilíbrio da proteostase e de fenótipos de crescimento aberrantes relevantes para pesquisas em câncer e neurodegeneração.
TCP-1 ζ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCT6A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCT6A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCT6A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCT6A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.