TAL2 Plasmide Double Nickase (m): sc-423262-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TAL2 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TAL2 Double Nickase Plasmid (m) e il TAL2 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Tal2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TAL2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-423262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TAL2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene Tal2 del topo codifica TAL2, un fattore di trascrizione basic helix–loop–helix (bHLH) che agisce in programmi di regolazione genica associandosi ad altre proteine bHLH e legandosi a elementi contenenti E-box, influenzando la specificazione di linea e la differenziazione cellulare. L’attività di TAL2 è collegata a reti di controllo trascrizionale che modellano i processi di sviluppo ematopoietico e neurale, nei quali una regolazione precisa dell’espressione dei geni bersaglio è necessaria per una maturazione normale. La deregolazione dei circuiti trascrizionali della famiglia TAL è stata implicata in proliferazione aberrante e stati di differenziazione alterati in modelli di neoplasie ematologiche, rendendo Tal2 un locus utile per esplorare le dipendenze oncogeniche da fattori di trascrizione. Lo studio di Tal2 in sistemi murini supporta la dissezione meccanicistica delle vie trascrizionali guidate da bHLH, degli effetti del contesto della cromatina e dei programmi di espressione genica a valle.
TAL2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Tal2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Tal2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Tal2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Tal2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.