T2R38 Plasmide Double Nickase (h): sc-402279-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- T2R38 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il T2R38 Double Nickase Plasmid (h) e il T2R38 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TAS2R38. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
T2R38 Plasmide Double Nickase (h) | sc-402279-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T2R38 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402279-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **TAS2R38** codifica per il recettore del gusto amaro **T2R38**, un GPCR di classe A noto soprattutto per la capacità di rilevare composti contenenti tiourea e di avviare la segnalazione canonica dei GPCR attraverso proteine G eterotrimeriche, la modulazione dei secondi messaggeri e programmi trascrizionali a valle responsivi alle MAPK. Oltre alla gustazione, l’espressione di T2R38 nelle vie aeree e in altri contesti epiteliali è stata collegata alla regolazione chemosensoriale delle risposte innate di barriera, incluse vie che influenzano l’attività ciliare e la segnalazione antimicrobica. Aplotipi comuni di **TAS2R38** alterano la responsività del recettore e sono stati studiati in relazione alle differenze interindividuali nella percezione dell’amaro, nel comportamento alimentare e nelle interazioni ospite–ambiente. Queste caratteristiche rendono **TAS2R38** un modello utile per analizzare la specificità di legame dei ligandi dei GPCR, la dinamica della trasduzione del segnale e i fenotipi dipendenti dal genotipo.
T2R38 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TAS2R38 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TAS2R38. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TAS2R38. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TAS2R38 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.