Syncoilin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406493

Panoramica

Il gene umano **SYNC** codifica la **sincoilina**, una proteina associata ai filamenti intermedi, arricchita nel muscolo scheletrico e cardiaco, che si localizza al **sarcolemma** e nelle regioni del **disco Z**. La sincoilina partecipa all’organizzazione del citoscheletro collegando le reti di filamenti intermedi ai complessi proteici associati alla distrofina, supportando l’integrità delle miofibre e la meccanotrasduzione durante la contrazione. Attraverso queste interazioni contribuisce alla differenziazione miogenica, alla stabilità del sarcolemma e al mantenimento dell’architettura muscolare sotto stress meccanico. Alterazioni dell’espressione di SYNC e la mislocalizzazione della sincoilina sono state riportate in contesti di patologia muscolare, rendendola rilevante per studi sul rimodellamento del citoscheletro associato alle miopatie e sulle vie di risposta allo stress.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Syncoilin (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SYNC in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SYNC insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SYNC a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Syncoilin.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SYNC per lo studio della segnalazione di Syncoilin, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SYNC critici per la funzione di Syncoilin
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SYNC per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Syncoilin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Syncoilin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SYNC. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Syncoilin Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Syncoilin (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SYNC per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SYNC definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.