SULT1C4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-417528

Panoramica

SULT1C4 codifica una sulfotransferasi citosolica che catalizza il trasferimento di un gruppo solfato dal 3′-fosfoadenosina-5′-fosfosolfato (PAPS) a substrati contenenti gruppi ossidrilici o amminici, generando metaboliti solfatati con solubilità e bioattività modificate. Questa reazione di coniugazione di fase II contribuisce alla detossificazione degli xenobiotici e alla modulazione di molecole endogene di segnalazione, intersecandosi con reti cellulari più ampie che controllano l’equilibrio redox, la responsività ormonale e la clearance dei metaboliti. Le variazioni nell’attività delle sulfotransferasi possono influenzare il destino metabolico di sostanze chimiche ambientali e farmaci, rendendo SULT1C4 rilevante per studi sulle differenze interindividuali nella sensibilità chimica e sul metabolismo specifico dei tessuti. Una capacità di solfatazione deregolata è stata inoltre collegata in letteratura a un’alterata biologia dell’esposizione e a fenotipi metabolici associati a malattia, supportando l’impiego di SULT1C4 come nodo funzionale nella ricerca incentrata sul metabolismo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SULT1C4 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SULT1C4 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SULT1C4 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SULT1C4 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SULT1C4.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SULT1C4 per lo studio della segnalazione di SULT1C4, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SULT1C4 critici per la funzione di SULT1C4
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SULT1C4 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SULT1C4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SULT1C4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SULT1C4. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SULT1C4 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SULT1C4 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SULT1C4 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SULT1C4 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.