Sprr1b Plasmide Double Nickase (m): sc-423137-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Sprr1b Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Sprr1b Double Nickase Plasmid (m) e il Sprr1b Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Sprr1b. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Sprr1b Plasmide Double Nickase (m) | sc-423137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Sprr1b Plasmide Double Nickase (m2) | sc-423137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Sprr1b (small proline-rich protein 1B) è un precursore dell’involucro corneificato nel topo che viene reticolato dalle transglutaminasi durante la differenziazione terminale dei cheratinociti, contribuendo alla formazione della barriera epidermica e alla resistenza meccanica. La sua espressione è indotta a valle di segnali di stress epiteliale e di differenziamento, ed è spesso utilizzato come marcatore di programmi di differenziazione squamosa che coinvolgono EGFR/MAPK e risposte trascrizionali regolate da AP-1. Oltre alla cute, Sprr1b può essere sovraespresso in epiteli lesionati e in tessuti in rigenerazione, riflettendo ruoli nella riparazione della barriera e nell’adattamento cellulare al danno. Un’espressione deregolata dei membri della famiglia SPRR è stata associata a condizioni cutanee ipercheratosiche e infiammatorie, nonché a contesti di rimodellamento epiteliale, rendendo Sprr1b rilevante per studi sulla disfunzione della barriera e sulla biologia dello stress epiteliale.
Sprr1b Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Sprr1b nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Sprr1b. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Sprr1b. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Sprr1b interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.