Slfn5 Plasmide Double Nickase (h): sc-408333-NIC

SLFN5 umano (Slfn5) è una proteina della famiglia Schlafen stimolata dall’interferone, implicata nella regolazione di programmi trascrizionali legati all’immunità innata, al controllo del ciclo cellulare e alla differenziazione cellulare. È stato riportato che Slfn5 modula l’espressione genica a valle della segnalazione interferone/JAK–STAT e influenza reti di risposta infiammatoria e antivirale, inclusi effetti sulla regolazione trascrizionale associata alla cromatina. Un’alterata espressione di SLFN5 è stata associata a cambiamenti nella proliferazione e nella migrazione delle cellule tumorali, nonché nelle firme geniche correlate all’immunità in molteplici contesti oncologici, a supporto della sua utilità come nodo meccanicistico negli studi sulla segnalazione oncogenica e infiammatoria. Queste proprietà rendono SLFN5 un bersaglio rilevante per analizzare vie guidate dall’interferone, la regolazione trascrizionale e fenotipi dipendenti dal contesto in modelli cellulari umani.

Slfn5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLFN5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLFN5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLFN5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLFN5 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.