SLC35F2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406765

Panoramica

SLC35F2 codifica un trasportatore di membrana a passaggi multipli previsto, localizzato su membrane intracellulari, con evidenze che ne supportano un ruolo nel traffico di soluti che influenza l’assorbimento cellulare e la distribuzione compartimentale di piccole molecole. In quanto membro della famiglia SLC35, SLC35F2 è associato a processi di trasporto di membrana che possono incidere sull’omeostasi metabolica, sulla funzione degli organelli e sulle risposte cellulari allo stress. Un’alterata attività del trasportatore può modulare l’esposizione intracellulare a xenobiotici e metaboliti endogeni, collegando SLC35F2 a meccanismi rilevanti per la farmacologia e la biologia delle cellule tumorali. Di conseguenza, SLC35F2 è spesso oggetto di studio in ricerche sulla sensibilità dipendente dal trasporto, sul fitness cellulare e sui determinanti a livello di via di risposta ai composti.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SLC35F2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SLC35F2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SLC35F2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SLC35F2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SLC35F2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SLC35F2 per lo studio della segnalazione di SLC35F2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni SLC35F2 critici per la funzione di SLC35F2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SLC35F2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal SLC35F2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SLC35F2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SLC35F2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal SLC35F2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SLC35F2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SLC35F2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SLC35F2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.