SLC35D2 Plasmide Double Nickase (h): sc-411557-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SLC35D2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SLC35D2 Double Nickase Plasmid (h) e il SLC35D2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLC35D2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SLC35D2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411557-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SLC35D2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411557-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35D2 codifica un trasportatore di zuccheri nucleotidici localizzato nelle membrane della via secretoria, dove contribuisce all’importazione di donatori di zuccheri attivati necessari per le reazioni di glicosilazione. Regolando la disponibilità di zuccheri nucleotidici nel reticolo endoplasmatico e nell’apparato di Golgi, SLC35D2 influenza la biosintesi di proteoglicani e glicoproteine che sostiene l’organizzazione della matrice extracellulare, il traffico dei recettori e la comunicazione cellula–cellula. L’alterazione del trasporto di zuccheri nucleotidici può rimodellare le strutture dei glicani e modificare gli esiti di segnalazione in vie rilevanti per lo sviluppo e per il sistema immunitario. Di conseguenza, SLC35D2 è studiato nel contesto dei disordini congeniti della glicosilazione e di meccanismi patologici più ampi in cui una glicosilazione aberrante compromette l’omeostasi cellulare.
SLC35D2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLC35D2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLC35D2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLC35D2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLC35D2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.