SH2D1A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404747-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SH2D1AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SH2D1A (h) e o Plasmídeo Double Nickase SH2D1A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SH2D1A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SH2D1A Anticorpo (A-8): sc-398118
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SH2D1A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SH2D1A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SH2D1A codifica uma proteína adaptadora contendo um domínio SH2 (SAP) que acopla receptores da família SLAM à sinalização a jusante em células T e células NK, moldando a função citotóxica, a produção de citocinas e a cooperação entre linfócitos. Ao modular interações com quinases e fosfatases inibitórias, SH2D1A influencia a formação da sinapse imunológica e os limiares de sinalização que governam respostas imunes antivirais e humorais. A perturbação de SH2D1A desorganiza vias mediadas por SLAM que controlam a atividade de linfócitos citotóxicos e a ajuda às células B, levando à desregulação imune. Variantes de perda de função estão associadas à doença linfoproliferativa ligada ao X tipo 1, com suscetibilidade a imunopatologia grave associada ao EBV e defeitos mais amplos na homeostase imunológica.
SH2D1A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SH2D1A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SH2D1A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SH2D1A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SH2D1A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.