SH2D1A Plasmide Double Nickase (h): sc-404747-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SH2D1A Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SH2D1A Double Nickase Plasmid (h) e il SH2D1A Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SH2D1A. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SH2D1A Antibody (A-8): sc-398118
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SH2D1A Plasmide Double Nickase (h) | sc-404747-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SH2D1A Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404747-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SH2D1A codifica una proteina adattatrice contenente un dominio SH2 (SAP) che collega i recettori della famiglia SLAM alla segnalazione a valle nelle cellule T e nelle cellule NK, plasmando la funzione citotossica, la produzione di citochine e la cooperazione tra linfociti. Modulando le interazioni con chinasi e fosfatasi inibitorie, SH2D1A influenza la formazione della sinapsi immunologica e le soglie di segnalazione che regolano le risposte immunitarie antivirali e umorali. Alterazioni di SH2D1A compromettono le vie mediate da SLAM che controllano l’attività dei linfociti citotossici e l’aiuto alle cellule B, portando a disregolazione immunitaria. Varianti con perdita di funzione sono associate alla malattia linfoproliferativa legata all’X di tipo 1, con suscettibilità a grave immunopatologia associata a EBV e a difetti più ampi dell’omeostasi immunitaria.
SH2D1A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SH2D1A nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SH2D1A. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SH2D1A. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SH2D1A interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.