Plásmido Doble Nickase (h) SDHC: sc-405559-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SDHC consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SDHC (h) y el plásmido de doble nickasa SDHC (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SDHC. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SDHC Anticuerpo (C-2): sc-515102
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SDHC | sc-405559-NIC | 20 µg | $410.00 |
SDHC codifica la subunidad C del complejo succinato deshidrogenasa anclada a la membrana, un componente esencial del complejo II mitocondrial que conecta el ciclo del ácido tricarboxílico (TCA) con la cadena de transporte de electrones al favorecer la oxidación del succinato y la transferencia de electrones a la ubiquinona. Como parte del anclaje en la membrana interna mitocondrial, SDHC ayuda a estabilizar el ensamblaje del complejo II y permite una fosforilación oxidativa eficiente, influyendo en el equilibrio redox celular y en el manejo de especies reactivas de oxígeno. La alteración de SDHC puede perjudicar la respiración mitocondrial y promover la acumulación de succinato, con efectos posteriores sobre la señalización metabólica y la regulación epigenética mediante cambios en la actividad de dioxigenasas dependientes de α-cetoglutarato. Las alteraciones en SDHC se asocian con disfunción mitocondrial y se han implicado en la biología del paraganglioma/feocromocitoma hereditarios, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudiar la reprogramación metabólica y las vías de respuesta al estrés.
SDHC El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SDHC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SDHC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SDHC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SDHC alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.