RARS2 Plasmide Double Nickase (h): sc-412751-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- RARS2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il RARS2 Double Nickase Plasmid (h) e il RARS2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira RARS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
RARS2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412751-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RARS2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412751-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RARS2 codifica l’arginil‑tRNA sintetasi mitocondriale, un enzima essenziale che lega l’arginina al rispettivo tRNA per sostenere la traduzione mitocondriale e la fosforilazione ossidativa. Mantenendo la sintesi delle subunità della catena respiratoria codificate dal genoma mitocondriale, RARS2 collega la carica degli aminoacil‑tRNA all’assemblaggio della catena di trasporto degli elettroni, alla produzione di ATP e alle risposte allo stress mitocondriale. Alterazioni della funzione di RARS2 sono state associate a fenotipi di malattia mitocondriale caratterizzati da un metabolismo energetico compromesso e coinvolgimento dello sviluppo neurologico, rendendolo un bersaglio rilevante per studiare le relazioni tra genotipo e funzione mitocondriale. La sua attività interseca vie che regolano la funzione del ribosoma mitocondriale, la proteostasi e la segnalazione integrata dello stress.
RARS2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus RARS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di RARS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di RARS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con RARS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.