PTTG2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-418367

Panoramica

PTTG2 (pituitary tumor-transforming gene 2) codifica una proteina di tipo securina coinvolta nella regolazione della separazione dei cromatidi fratelli e della progressione del ciclo cellulare, con legami al controllo del checkpoint mitotico e al mantenimento della stabilità genomica. Nell’ambito delle vie che coordinano l’inizio dell’anafase e l’attività proteasica implicata nella segregazione cromosomica, un’alterata espressione di PTTG2 può influenzare la proliferazione, l’aneuploidia e le risposte cellulari allo stress. La deregolazione dei membri della famiglia PTTG è stata riportata in molteplici tipi di tumore, a supporto dell’indagine di PTTG2 in contesti di segnalazione oncogenica e in fenotipi guidati dal ciclo cellulare. PTTG2 umano è quindi rilevante per studi meccanicistici su mitosi, danno associato alla replicazione e programmi trascrizionali accoppiati allo stato proliferativo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO PTTG2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene PTTG2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del PTTG2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto PTTG2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina PTTG2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di PTTG2 per lo studio della segnalazione di PTTG2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni PTTG2 critici per la funzione di PTTG2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di PTTG2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal PTTG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal PTTG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus PTTG2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal PTTG2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR PTTG2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia PTTG2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio PTTG2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.