PRDM10 Plasmide Double Nickase (h): sc-412741-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- PRDM10 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il PRDM10 Double Nickase Plasmid (h) e il PRDM10 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira PRDM10. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: PRDM10 Antibody (48AT1224.90.46): sc-130240
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
PRDM10 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412741-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PRDM10 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-412741-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRDM10 (PR domain containing 10) è un regolatore trascrizionale nucleare appartenente alla famiglia dei domini PR/SET che contribuisce a coordinare programmi di espressione genica legati all’organizzazione della cromatina e al mantenimento dello stato cellulare. Attraverso interazioni con partner leganti il DNA e complessi associati alla cromatina, PRDM10 è in grado di influenzare reti trascrizionali che governano proliferazione, differenziamento e circuiti regolatori specifici di linea cellulare. Alterazioni dell’attività della famiglia PRDM sono state associate a un controllo epigenetico deregolato in contesti oncologici e dello sviluppo, rendendo PRDM10 un nodo utile per studiare meccanismi trascrizionali e dipendenti dalla cromatina. L’indagine della funzione di PRDM10 supporta analisi a livello di pathway della regolazione genica, della stabilità epigenomica e di output trascrizionali dipendenti dal contesto nelle cellule umane.
PRDM10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus PRDM10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di PRDM10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di PRDM10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con PRDM10 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.