Per2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422193-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Per2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Per2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Per2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Per2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Per2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422193-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Per2 de camundongo (Period circadian regulator 2) codifica um componente central do relógio circadiano molecular, que participa do circuito de retroalimentação transcricional–traducional responsável por controlar a expressão gênica rítmica. A PER2 forma complexos com outras proteínas do relógio para modular a atividade do complexo CLOCK–BMAL1, moldando oscilações no metabolismo, na progressão do ciclo celular, nas respostas a dano no DNA e na sinalização neuronal e endócrina. Alterações na função de Per2 têm sido associadas à desregulação dos ritmos circadianos e a mudanças subsequentes na sinalização inflamatória, na homeostase metabólica e em vias de resposta ao estresse. Em pesquisa biomédica, o Per2 é frequentemente estudado por seu papel na regulação dependente do tempo da fisiologia e por como a desregulação circadiana influencia fenótipos relevantes para doenças em modelos murinos.
Per2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Per2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Per2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Per2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Per2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.