p38IP Plasmide Double Nickase (h): sc-409288-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- p38IP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il p38IP Double Nickase Plasmid (h) e il p38IP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SUPT20H. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: p38IP Antibody (C-7): sc-374665
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
p38IP Plasmide Double Nickase (h) | sc-409288-NIC | 20 µg | $410.00 |
SUPT20H codifica p38IP, un adattatore conservato che si associa alla segnalazione MAPK p38 e ai complessi di regolazione della cromatina per coordinare la trascrizione in risposta allo stress. p38IP è stato collegato alla modulazione degli output della via MAPK e alla regolazione di programmi di espressione genica che influenzano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e le risposte infiammatorie. Attraverso queste funzioni, SUPT20H/p38IP contribuisce all’omeostasi cellulare in condizioni di stress genotossico e ambientale ed è studiato in contesti in cui una segnalazione MAPK deregolata e un controllo trascrizionale alterato sono implicati in fenotipi rilevanti per la malattia, inclusi cambiamenti nella proliferazione e nella segnalazione immunitaria.
p38IP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SUPT20H nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SUPT20H. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SUPT20H. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SUPT20H interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.