Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p22HBP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420826
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- p22HBP Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico p22HBP, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: p22HBP Antibody (B-3): sc-398612
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
p22HBP Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420826 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Hebp1 nel topo codifica p22HBP, una proteina legante l’eme implicata nel traffico intracellulare dell’eme e nella regolazione redox eme-dipendente. p22HBP è stata associata a processi correlati ai mitocondri, alle risposte allo stress ossidativo e alla modulazione dell’apoptosi, in linea con un ruolo nel mantenimento dell’omeostasi cellulare in condizioni di stress metabolico. Attraverso interazioni con l’eme e con la segnalazione derivata dall’eme, Hebp1 può influenzare vie legate all’equilibrio delle specie reattive dell’ossigeno, alla funzione mitocondriale e al controllo qualità delle proteine. La disregolazione della gestione dell’eme e il danno ossidativo sono rilevanti per la neurodegenerazione e per il danno tissutale infiammatorio, rendendo Hebp1 un bersaglio utile per studi meccanicistici in questi contesti.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO p22HBP (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Hebp1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Hebp1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Hebp1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina p22HBP.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Hebp1 per lo studio della segnalazione di p22HBP, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Hebp1 critici per la funzione di p22HBP
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Hebp1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal p22HBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal p22HBP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Hebp1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal p22HBP Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR p22HBP (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Hebp1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Hebp1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.