Nova-2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404452-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Nova-2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Nova-2 Double Nickase Plasmid (h) e il Nova-2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira NOVA2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Nova-2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404452-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nova-2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404452-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOVA2 codifica Nova-2, una proteina legante l’RNA arricchita nei neuroni che riconosce motivi YCAY per controllare lo splicing alternativo, la stabilità dell’mRNA e la localizzazione dei trascritti coinvolti nella funzione sinaptica e nella maturazione neuronale. Attraverso la regolazione del processamento del pre‑mRNA, Nova-2 contribuisce a modellare programmi di espressione genica dipendenti dall’attività e alla correttezza dei percorsi di guida assonale, sinaptogenesi e neurotrasmissione. La perturbazione delle reti di splicing dipendenti da NOVA2 è stata collegata a fenotipi di neurosviluppo e ad alterazioni della funzione dei circuiti neuronali, rendendo NOVA2 un nodo utile per indagare difetti di processamento dell’RNA nella biologia del sistema nervoso. NOVA2 è anche studiato nell’ambito di circuiti regolatori più ampi dei fattori di splicing che intersecano il metabolismo dell’RNA responsivo allo stress e il rimodellamento del trascrittoma specifico di tipo cellulare.
Nova-2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus NOVA2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di NOVA2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di NOVA2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con NOVA2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.