NFXL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407389

Descripción general

NFXL1 codifica un regulador transcripcional que contiene dedos de zinc y que se ha implicado en el control de programas de expresión génica vinculados a la diferenciación celular y a la señalización sensible al estrés. Como presunto factor de unión al ADN, se espera que NFXL1 influya en redes transcripcionales que moldean procesos epiteliales e inmunitarios, incluidas vías que regulan el tono inflamatorio y la función de barrera. Estudios genéticos y funcionales en humanos han asociado NFXL1 con fenotipos del neurodesarrollo, lo que respalda su relevancia para investigar la regulación génica en el contexto del desarrollo cerebral y la función cognitiva. Desentrañar las salidas transcripcionales dependientes de NFXL1 puede ayudar a aclarar las dianas downstream y la interacción entre vías que contribuyen a estados complejos de expresión asociados a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NFXL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NFXL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NFXL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NFXL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NFXL1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NFXL1 para la investigación de la señalización de NFXL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NFXL1 críticos para la función de NFXL1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NFXL1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NFXL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NFXL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NFXL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NFXL1 (h) y el plásmido HDR NFXL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NFXL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NFXL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.