Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
N-CoR Plasmide Double Nickase (m): sc-422771-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- N-CoR Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il N-CoR Double Nickase Plasmid (m) e il N-CoR Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ncor1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: N-CoR Antibody (F-1): sc-515934
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
N-CoR Plasmide Double Nickase (m) | sc-422771-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Ncor1 codifica il corepressore dei recettori nucleari 1 (N-CoR), una proteina “scaffold” che assembla complessi di repressione trascrizionale con HDAC3 e altri cofattori per regolare l’accessibilità della cromatina e i programmi di espressione genica. N-CoR modula la segnalazione a valle dei recettori nucleari e dei fattori di trascrizione che definiscono il destino di linea, influenzando le decisioni sul destino cellulare, l’omeostasi metabolica e le reti geniche immunitarie e infiammatorie. Attraverso il controllo epigenetico dell’attività di enhancer e promotori, N-CoR contribuisce alla regolazione coordinata della differenziazione, delle risposte circadiane e ormonali e di stati trascrizionali adattativi allo stress. Una funzione disregolata di Ncor1/N-CoR è stata implicata in vie rilevanti per lo sviluppo neurobiologico, il metabolismo e fenotipi associati al sistema immunitario, rendendolo un nodo utile per studi meccanicistici in modelli murini.
N-CoR Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ncor1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ncor1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ncor1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ncor1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.