Mucin 5B/MUC5B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401077-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Mucin 5B/MUC5BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Mucin 5B/MUC5B (h) e o Plasmídeo Double Nickase Mucin 5B/MUC5B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MUC5B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mucin 5B/MUC5B Anticorpo (5B#19-2E): sc-21768
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mucin 5B/MUC5B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401077-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 5B/MUC5B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401077-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC5B codifica a mucina 5B, uma mucina secretada de alto peso molecular, formadora de gel, intensamente O-glicosilada e que polimeriza por meio de ligações dissulfeto para formar a barreira de muco nas vias aéreas e em outros epitélios mucosos. Essa barreira regula a depuração mucociliar, a hidratação e a defesa inata ao moldar as propriedades viscoelásticas do muco e influenciar as interações com microrganismos e partículas. A expressão de MUC5B é controlada por programas de diferenciação epitelial e por vias de sinalização inflamatória, incluindo respostas transcricionais induzidas por citocinas e o processamento secretório RE–Golgi que sustenta a biossíntese de mucinas. Níveis desregulados de MUC5B ou propriedades alteradas do muco têm sido implicados em doenças crônicas das vias aéreas e em patologia pulmonar fibrótica, tornando-o um alvo fundamental para o estudo da homeostase epitelial e dos mecanismos de defesa mucosa.
Mucin 5B/MUC5B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MUC5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MUC5B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MUC5B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MUC5B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.