Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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mHMGCS Plasmide Double Nickase (h): sc-403941-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- mHMGCS Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il mHMGCS Double Nickase Plasmid (h) e il mHMGCS Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HMGCS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: mHMGCS Antibody (B-8): sc-393256
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
mHMGCS Plasmide Double Nickase (h) | sc-403941-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mHMGCS Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403941-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HMGCS2 codifica la 3-idrossi-3-metilglutaril-CoA sintasi mitocondriale (mHMGCS), l’enzima limitante la velocità della chetogenesi epatica che converte acetoacetil-CoA e acetil-CoA in HMG-CoA. Questa attività collega la β-ossidazione degli acidi grassi alla produzione di corpi chetonici e sostiene l’adattamento metabolico durante il digiuno e altri stati di stress da carenza di nutrienti. La funzione di mHMGCS si integra con la gestione mitocondriale dell’acetil-CoA, l’equilibrio redox e le vie dell’omeostasi energetica; una sua disregolazione è stata implicata negli errori congeniti della sintesi dei corpi chetonici e in fenotipi metabolici più ampi. Alterazioni dell’espressione di HMGCS2 sono state inoltre studiate in relazione al metabolismo epatico, alle risposte allo stress ossidativo e al rimodellamento metabolico associato a stati cellulari rilevanti per la malattia.
mHMGCS Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HMGCS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HMGCS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HMGCS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HMGCS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.