Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MDMX Plasmide Double Nickase (h): sc-417855-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- MDMX Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il MDMX Double Nickase Plasmid (h) e il MDMX Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MDM4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: MDMX Antibody (G-10): sc-74467
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
MDMX Plasmide Double Nickase (h) | sc-417855-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDMX Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417855-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MDM4 codifica MDMX, un importante regolatore negativo della via oncosoppressiva di TP53 che modula programmi trascrizionali dipendenti da p53, responsabili dell’arresto del ciclo cellulare, dell’apoptosi e delle risposte al danno al DNA. MDMX si lega a p53 e coopera con MDM2 nel limitarne l’attività, influenzando così la segnalazione dei checkpoint e la tolleranza cellulare allo stress. Alterazioni dell’espressione di MDM4 o della funzione di MDMX sono state associate a una deregolazione della segnalazione di p53 in molteplici contesti rilevanti per il cancro e a un’alterazione dei meccanismi di sorveglianza del genoma. Di conseguenza, MDM4 è ampiamente studiato per il suo ruolo nel rimodellamento delle vie oncogeniche, nelle risposte allo stress replicativo e nella robustezza della rete di p53.
MDMX Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MDM4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MDM4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MDM4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MDM4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.