Max Plasmide Double Nickase (h): sc-400596-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Max Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Max Double Nickase Plasmid (h) e il Max Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira MAX. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Max Antibody (H-2): sc-8011
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Max Plasmide Double Nickase (h) | sc-400596-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Max Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400596-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **MAX** codifica Max, un fattore di trascrizione basic helix–loop–helix leucine zipper (bHLH-LZ) che dimerizza con le proteine della famiglia **MYC** per regolare programmi di espressione genica dipendenti dagli **E-box**, che controllano crescita cellulare, metabolismo, biogenesi dei ribosomi e progressione del ciclo cellulare. Max forma anche complessi repressivi con partner **MXD/MNT**, fornendo un contrappeso all’attivazione trascrizionale guidata da MYC e contribuendo a mantenere l’omeostasi trascrizionale. Attraverso questi dimeri attivatori e repressivi dipendenti dal contesto, MAX opera all’interno della rete di segnalazione **MYC/MAX/MAD** e si interfaccia con la regolazione della cromatina per modellare output trascrizionali specifici per linea cellulare e per stimolo. Un’alterata attività di MAX o la perturbazione dell’asse **MYC–MAX** è stata collegata a proliferazione deregolata e a stati trascrizionali oncogenici, sostenendone lo studio nella biologia tumorale, nell’adattamento metabolico e nel controllo trascrizionale.
Max Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus MAX nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di MAX. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di MAX. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con MAX interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.