Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Mac-2BP Plasmide Double Nickase (h): sc-403108-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mac-2BP Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mac-2BP Double Nickase Plasmid (h) e il Mac-2BP Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LGALS3BP. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mac-2BP Antibody (E-8): sc-374541
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mac-2BP Plasmide Double Nickase (h) | sc-403108-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mac-2BP Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403108-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LGALS3BP codifica Mac-2BP (proteina legante la galectina-3), una glicoproteina secreta e associata alla matrice extracellulare che modula le interazioni cellula–cellula e cellula–matrice tramite partner di legame quali galectine e integrine. Mac-2BP è implicata in adesione, migrazione, modulazione immunitaria e rimodellamento del microambiente extracellulare, con effetti a valle sulla segnalazione infiammatoria e sulla comunicazione tra tumore e stroma. Un’espressione alterata di LGALS3BP è stata riportata in molteplici contesti oncologici e fibrotici/infiammatori ed è spesso valutata come componente del secretoma associato alla malattia e collegata a biomarcatori. Queste caratteristiche rendono LGALS3BP un bersaglio utile per studiare la regolazione del microambiente, il crosstalk immuno–epiteliale e vie rilevanti per la metastasi in modelli cellulari umani.
Mac-2BP Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LGALS3BP nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LGALS3BP. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LGALS3BP. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LGALS3BP interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.