Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
LMTK3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403191
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LMTK3 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico LMTK3, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LMTK3 Antibody (I-17): sc-100418
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LMTK3 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403191 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
LMTK3 (lemur tyrosine kinase 3) codifica una chinasi serina/treonina associata alla membrana, implicata nella regolazione della segnalazione intracellulare e delle vie di traffico vescicolare che influenzano il turnover dei recettori e la durata del segnale. In contesti epiteliali, LMTK3 è stata collegata alla modulazione di programmi trascrizionali guidati da chinasi e al crosstalk con la segnalazione dei recettori ormonali, contribuendo a determinare la proliferazione cellulare e le risposte allo stress. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di LMTK3 sono state riportate in diversi contesti rilevanti per il cancro, dove viene studiata per il suo impatto sulla risposta ai fattori di crescita, sulla segnalazione di sopravvivenza e su fenotipi di resistenza associati alle terapie. Di conseguenza, LMTK3 rappresenta un bersaglio utile per analizzare l’architettura delle reti di chinasi, la dinamica delle membrane endocellulari e gli output trascrizionali a valle in sistemi modello umani.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LMTK3 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene LMTK3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del LMTK3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto LMTK3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LMTK3.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di LMTK3 per lo studio della segnalazione di LMTK3, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni LMTK3 critici per la funzione di LMTK3
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di LMTK3 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal LMTK3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LMTK3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus LMTK3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal LMTK3 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LMTK3 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia LMTK3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio LMTK3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.