LCRG1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-410137

Panoramica

GGNBP2 (noto anche come LCRG1) codifica una proteina nucleare coinvolta nella regolazione della trascrizione e nel mantenimento dei programmi cellulari di controllo della crescita. Le funzioni riportate collegano LCRG1 alla modulazione della progressione del ciclo cellulare, a processi associati alla cromatina e alla regolazione, dipendente dal contesto, dei percorsi di proliferazione e differenziamento. Un’alterata espressione di GGNBP2/LCRG1 è stata osservata in molteplici tipi di tumore, a supporto della sua utilità come bersaglio di ricerca per lo studio della segnalazione oncogenica, della stabilità del genoma e delle reti trascrizionali associate ai tumori. Nei modelli cellulari umani, la perturbazione di GGNBP2 può aiutare a chiarire gli effetti a livello di via sulla proliferazione, sull’apoptosi e sui programmi di espressione genica specifici di linea cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO LCRG1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene GGNBP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del GGNBP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto GGNBP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina LCRG1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di GGNBP2 per lo studio della segnalazione di LCRG1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni GGNBP2 critici per la funzione di LCRG1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di GGNBP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal LCRG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal LCRG1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus GGNBP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal LCRG1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR LCRG1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia GGNBP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio GGNBP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.