Integrin αX/ITGAX/CD11c Plasmide Double Nickase (h): sc-401765-NIC

ITGAX codifica l’integrina αX (CD11c), che forma un eterodimero con l’integrina β2 (CD18) costituendo il recettore del complemento 4 (CR4), un importante recettore di adesione e riconoscimento su cellule dendritiche, monociti, macrofagi e su alcuni sottogruppi di neutrofili. CD11c media l’adesione, la migrazione e la fagocitosi dei leucociti legandosi a ligandi quali particelle opsonizzate con iC3b e il fibrinogeno, coordinando segnali “outside-in” che si integrano con il rimodellamento del citoscheletro e con programmi trascrizionali infiammatori. Attraverso la segnalazione dipendente dalle integrine e il crosstalk con i recettori dell’immunità innata, ITGAX contribuisce alla captazione dell’antigene, alle interazioni cellula–cellula e alla modulazione delle risposte immunitarie adattative. Alterazioni dell’espressione e della funzione di CD11c sono studiate in contesti quali infiammazione cronica, autoimmunità, biologia mieloide associata ai tumori e deregolazione della sorveglianza immunitaria tissutale.

Integrin αX/ITGAX/CD11c Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGAX nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGAX. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGAX. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGAX interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.