Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Integrin β5/ITGB5 Plasmide Double Nickase (h): sc-401017-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin β5/ITGB5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin β5/ITGB5 Double Nickase Plasmid (h) e il Integrin β5/ITGB5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ITGB5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Integrin β5/ITGB5 Antibody (F-5): sc-398214
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin β5/ITGB5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin β5/ITGB5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB5 codifica l’integrina β5, un recettore di adesione transmembrana che eterodimerizza principalmente con l’integrina αV per formare αVβ5, collegando i ligandi della matrice extracellulare al citoscheletro di actina. Questo recettore partecipa all’assemblaggio delle adesioni focali e alla segnalazione bidirezionale che regola adesione, espansione (spreading), migrazione e meccanotrasduzione attraverso vie come FAK/SRC, PI3K–AKT e MAPK. αVβ5 contribuisce anche alla segnalazione associata all’endocitosi e può influenzare le dinamiche di attivazione del TGF-β a seconda del contesto cellulare. Una deregolazione dell’espressione di ITGB5 o della segnalazione mediata da integrine è stata associata a cambiamenti nel comportamento invasivo, nelle risposte angiogeniche e nei programmi di rimodellamento osservati in diversi modelli di tumore e di malattie fibrotiche.
Integrin β5/ITGB5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ITGB5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ITGB5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ITGB5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ITGB5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.