Integrin α2/ITGA2/CD49b Plasmide Double Nickase (m): sc-421159-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Integrin α2/ITGA2/CD49b Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (m) e il Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Itga2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Integrin α2/ITGA2/CD49b Antibody (C-9): sc-74466
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Integrin α2/ITGA2/CD49b Plasmide Double Nickase (m) | sc-421159-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α2/ITGA2/CD49b Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421159-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino *Itga2* codifica l’integrina α2 (ITGA2/CD49b), una subunità α che forma un eterodimero con l’integrina β1 per costituire un recettore in grado di legare collagene e laminina, collegando la matrice extracellulare al citoscheletro di actina. Attraverso la segnalazione outside-in e inside-out, ITGA2 modula l’assemblaggio delle adesioni focali e vie a valle che includono FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, influenzando adesione, migrazione, sopravvivenza e meccanotrasduzione cellulari. ITGA2 contribuisce inoltre alle interazioni di piastrine e cellule immunitarie con matrici ricche di collagene, incidendo sulle risposte emostatiche e infiammatorie. Una segnalazione deregolata dell’integrina α2 è stata associata a un rimodellamento tissutale alterato e a fenotipi invasivi in diversi modelli di malattia, rendendo *Itga2* un bersaglio utile per analizzare il dialogo tra cellula e matrice.
Integrin α2/ITGA2/CD49b Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Itga2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Itga2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Itga2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Itga2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.