ING2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-404193

Panoramica

ING2 (inhibitor of growth family member 2) è una proteina nucleare associata alla soppressione tumorale che funziona come lettore della cromatina tramite il dominio PHD C-terminale, riconoscendo H3K4me3 e coordinando programmi trascrizionali legati alla segnalazione del danno al DNA e al controllo del ciclo cellulare. Partecipa alla regolazione epigenetica interagendo con complessi di acetiltransferasi/deacetilasi degli istoni e modulando risposte allo stress dipendenti da p53, influenzando così apoptosi, senescenza e stabilità genomica. ING2 è stata collegata a vie che controllano l’accessibilità della cromatina e il reclutamento di fattori di riparazione in seguito a stress genotossico. Alterazioni dell’espressione o della funzione di ING2 sono state riportate in molteplici contesti oncologici e vengono studiate per il loro contributo, a livello molecolare, alla trasformazione oncogena, al potenziale metastatico e ai meccanismi di resistenza alle terapie.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ING2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ING2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ING2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ING2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ING2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ING2 per lo studio della segnalazione di ING2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ING2 critici per la funzione di ING2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ING2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ING2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ING2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ING2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ING2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ING2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ING2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ING2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.