ING2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404193

Descripción general

ING2 (miembro 2 de la familia de inhibidores del crecimiento) es una proteína nuclear asociada a la supresión tumoral que funciona como lectora de cromatina a través de su dedo PHD C-terminal, reconociendo H3K4me3 y coordinando programas transcripcionales vinculados a la señalización del daño en el ADN y al control del ciclo celular. Participa en la regulación epigenética al interactuar con complejos de acetiltransferasas/desacetilasas de histonas y modular respuestas al estrés dependientes de p53, influyendo así en la apoptosis, la senescencia y la estabilidad genómica. ING2 se ha relacionado con vías que controlan la accesibilidad de la cromatina y el reclutamiento de factores de reparación tras el estrés genotóxico. Se han descrito alteraciones en la expresión o la función de ING2 en múltiples contextos de cáncer, y se estudia su contribución a la transformación oncogénica, el potencial metastásico y los mecanismos de resistencia a terapias a nivel molecular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ING2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ING2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ING2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ING2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ING2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ING2 para la investigación de la señalización de ING2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ING2 críticos para la función de ING2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ING2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ING2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ING2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ING2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ING2 (h) y el plásmido HDR ING2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ING2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ING2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.