HoxC4 Plasmide Double Nickase (h): sc-405942-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxC4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxC4 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxC4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXC4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxC4 Antibody (G-12): sc-398460
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxC4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405942-NIC | 20 µg | $410.00 |
HOXC4 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxC4, un regolatore che si lega al DNA e contribuisce a stabilire l’identità posizionale e a coordinare i programmi di espressione genica durante il patterning embrionale e la differenziazione dei tessuti. Come parte di reti trascrizionali dipendenti dai geni HOX, HoxC4 influenza gli stati della cromatina e della trascrizione che governano l’impegno di linea, la proliferazione e la morfogenesi. Un’espressione deregolata di HOXC4 è stata associata a stati di differenziamento alterati e a un rimodellamento trascrizionale osservato in disturbi dello sviluppo e in molteplici contesti tumorali, a supporto del suo impiego come nodo molecolare negli studi della regolazione genica oncogenica. L’HOXC4 umano è inoltre studiato per le sue interazioni con cofattori che modulano l’attività di promotori ed enhancer, consentendo analisi a livello di via dei circuiti regolatori guidati dagli homeobox.
HoxC4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXC4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXC4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXC4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXC4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.